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動物源性樣品中瘦肉精檢測的解決方案
2011-03-24
瘦肉精是一類動物用藥，有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等。將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。在中國，通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。
動物源性樣品中瘦肉精的檢測方法：
1. 動物源性樣品中β-受體激動劑的檢測(SPE-LC/MS)
1) SPE方法
貨號：60107-304
固定相：Thermo HyperSep Retain-CX
柱體積：3ml
固定相重量：200mg
酶解：動物源性樣品2g(精確到0.01g)于50ml離心管中，加入0.2mol/L乙酸銨溶液(pH5.2)10ml，然后加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶40μl，渦旋混勻3min，于37℃下水浴避光振蕩16h。
提?。簶悠访附夂蠓胖弥潦覝兀瑴u旋混勻3min，高速離心10min，取出上清液，加入1mol/L高氯酸溶液1ml，渦旋，混勻，高速離心10min后，轉(zhuǎn)移上清液至另一50ml離心管內(nèi)。
活化：3ml甲醇，3ml水，3ml0.5mol/L高氯酸
上樣：樣品
清洗：3ml水，3ml甲醇，柱子抽干
洗脫：3ml5%氨水甲醇溶液
2)LC/MS方法
色譜柱：Hypersil Gold，5μm，2.1×150mm
貨號：25005-152130
流動相：A：水(5mM乙酸銨)B：甲醇，梯度洗脫程序：
表1 流動相梯度洗脫條件
Time(min)A(%)B(%)
09010
0.59010
51090
101090
10.19010
129010
進(jìn)樣量：10μL
流速：250μL /min
MS條件：電噴霧電離源(ESI)，正離子模式
選擇反應(yīng)監(jiān)控(SRM)掃描模式
噴霧電壓：4500V
離子傳輸管溫度：350℃
結(jié)果
1. 典型LC/MS/MS色譜圖
3. 定量限(LOQ)：本方法沙丁胺醇、非諾特羅、氯丙那林、萊克多巴胺、克倫特羅、妥布特羅、噴布特羅和心得安在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動物源性食品組織中的定量限均可達(dá)0.1μg/kg，西馬特羅、特布他林為0.5μg/kg。提取回收率均可達(dá)75-120%。
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